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被引超900次!F4/80抗體(CI:A3-1)精準搞定小鼠巨噬細胞研究

更新時間:2025-11-11   點擊次數:178次

巨噬細胞構成了一種異質性單核細胞群體,對于維持內穩態至關重要,并作為先天免疫反應的第一道防線,宿主通過其對抗病原體。單核細胞-巨噬細胞譜系細胞是免疫系統中功能多樣性和可塑性最高的細胞之一,包括血液循環中的單核細胞及組織中的巨噬細胞。單核細胞是巨噬細胞的前體,來源于骨髓,在血液循環中存在數小時或者數日后進入組織,分化為巨噬細胞。巨噬細胞可存在于皮下組織、實質器官的腔隙、肝竇、脾竇和淋巴竇等微生物可能入侵的部位。巨噬細胞可以對微生物做出快速的反應,并可在炎癥部位留存更長時間。因此,巨噬細胞是固有免疫應答反應晚期,也就是感染1-2天時的主要效應細胞。


小鼠巨噬細胞研究

 

巨噬細胞最初是通過其表達CD11b被識別的,直到后來發現CD11b也在其他細胞群體中表達,如多形核白細胞、自然殺傷細胞、樹突狀細胞和B淋巴細胞。在1981年,Austyn和Gordon報道了一個雜交瘤克隆,該克隆產生了一種單克隆抗體,命名為F4/80,識別巨噬細胞特異性表面抗原。該F4/80抗體不與其他造血干細胞分化來的細胞反應,如成纖維細胞、多核細胞和淋巴細胞,研究發現這些細胞與巨噬細胞共享許多受體和表面抗原。

 

此外,F4/80抗體也無法識別豚鼠腹膜巨噬細胞、老鼠和兔子骨髓來源的巨噬細胞,以及人類單核細胞和肺巨噬細胞。目前F4/80被廣泛的用來鑒定和研究小鼠的巨噬細胞,在多種巨噬細胞亞群中表達,包括肝臟庫普弗細胞、駐留的骨髓巨噬細胞、胸腺皮質巨噬細胞、脾臟紅髓巨噬細胞、淋巴結髓質巨噬細胞以及大腦中的小膠質細胞。

 

Bio-Rad公司生產的F4/80抗體,克隆號為CI:A3-1,其性能良好,被文章廣泛報道。該克隆可追溯到1981年首-次發現的F4/80抗體,迄今為止已經被文章數百次的引用,其中900多次被CiteAb平臺列出。CI:A3-1經過多年的市場檢驗具有客戶認可的高特異性特點,可以準確的鑒定出小鼠的各種巨噬細胞亞群,尤其在神經系統研究中對小膠質細胞的檢測表現尤為突出。

結果圖

結果圖來源于DOI: 10.1038/labinvest.2011.128

 

上圖是文章報道的F4/80在研究惡性星型膠質瘤侵襲和轉移中的作用,通過免疫熒光的方法檢測F4/80和CD68在腫瘤小鼠模型的腦切片中的表達及分布,通過檢測的結果即腫瘤原發區的F4/80highCD68high的TAM(腫瘤相關巨噬細胞)圖a及腫瘤邊緣侵襲區F4/80highCD68low的TAM圖b是兩種不同表型的TAM亞群提出特定亞型的 TAM可能對膠質瘤侵襲性更為重要假設。

 

Clone:CI:A3-1抗體不僅適用于免疫熒光實驗,在免疫組化實驗中也能檢測出準確的結果。

 

研究重癥急性胰腺炎及因此發生的肺部損傷并發癥,肺部巨噬細胞募集引發的炎癥反應是評價肺損傷嚴重程度的重要指標。免疫組化檢測小鼠胰腺和肺組織切片中F4/80+巨噬細胞含量,分析不同實驗組:胰腺炎模型小鼠組(Ligated)、假手術組(sham)和野生型小鼠組(Healthy)的F4/80隨時間推移表達量的變化,明顯發現胰腺炎模型組的小鼠F4/80的表達量明顯高于其他組,并且隨著炎癥的發展胰腺和肺部浸潤的巨噬細胞含量不斷增加。

結果圖

結果圖發表自文章doi.org/10.1371/journal.pone.0042654

 

染料標記的CI:A2-1抗體可以通過流式技術快速的鑒定出組織樣本中巨噬細胞亞群的含量,這是檢測巨噬細胞最-常-用的技術之一。

 

中樞神經系統包括實質小膠質細胞(Microglia)和邊緣相關的巨噬細胞(BAMs)。后者與中樞神經系統 (CNS) 的邊界相關,包括血管周圍間隙、腦膜(硬腦膜和軟腦膜)和脈絡叢,通過研究維持BAMs穩態的相關機制及影響因素可以完整揭示血管細胞和中樞神經系統巨噬細胞之間的相互作用,從而調節腦血管功能。

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(DOI: 10.1016/j.immuni.2025.04.003)

 

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參考文獻

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